Vækstfaktorers virkning på genexpression af specifikke leverfunktioner

Primærkulturer af rotteleverceller med lav og høj celletæthed er anvendt som model for hhv.

rege-Biokemi og Genetik

167

nerende og udvokset lever (se årbog 1995). Pro-jektet er afsluttet med undersøgelser af hepatocyt vækstfaktors (HGFs) virkning på glucagons effek-ter på gluconeogenesen og mRNA niveauet for phosphoenolpyruvat carboxykinase. Det er vist, at HGF i lighed med insulin nedsætter glucagons sti-mulerende virkning på disse variable. Projektet udføres i samarbejde med N. Tygstrup og X. Peng, Medicinsk Afdeling A, RH (Niels Grunnet, John Dich).

Omdannelse af kulhydrat til henholdsvis varme og fedt hos normale mennesker

Det har været fremført, at fedme hos mennesker kun kan skyldes fedt i kosten og ikke kulhydrater.

Såfremt dette er tilfældet kan det skyldes at men-nesker ikke er i stand til at omdanne kulhydrater til fedtsyrer.

Undersøgelsens formål er at belyse, om menne-sker, der i en 3-ugers periode indtager et overskud af energi enten som fedt eller kulhydrat, depone-rer dette overskud forskelligt. Projektet udføres på mandlige studerende. Stof- og energiomsætnin-gen undersøges i kalorimeterkamre, og de novo li-pogenesen ved masseisotopomer fordelingsanaly-se efter indgift af [¹³C]acetat. De foreløbige resul-tater tyder på at overskud af energi deponeres som fedt uanset om overskuddet indtages som fedt eller kulhydrat. Projektet udføres i samarbej-de med O. Lammert og P. Faber, OU, L. Olesen Larsen, KU og M. K. Hellerstein, Univ. California (John Dich, Niels Grunnet, Bjørn Quistorff).

Karakterisering og anvendelse af skeletmuskler i kultur; primær-myotubes

Isolering, oprensning og dyrkningsbetingelser for primære myotubes er i løbet af 1996 blevet færdig-gjort således, at man nu har to modeller til in vitro studier af muskelstofskiftet: En serum-fri og en se-rum-betinget. Modellerne har været (og er stadig) anvendt til bestemmelse af glycogenmetabolis-mens systematik samt laktat- og pyruvat-transport.

Endelig er der udviklet et ikke toxisk elektrosti-muleringssystem der anvendes i forbindelse med arbejdsfysiologisk simulering. Arbejdet udføres i samarbejde med Lena von Grumbekow og Car-sten Juel, AKI (Peter Elsner, Niels Grunnet, Bjørn Quistorff, John Dich).

Krystalkinetiskeundersøgelser af biomineraler

Arbejdet sigter mod forebyggelse og behandling af såvel nogle tand-, led- og knoglesydomme som af fremkomst af nyre- og galdesten. Specielt un-dersøges dannelses-, vækst- og opløsningsproces-ser af tungtopløselige calciumforbindelopløsningsproces-ser. Un-dersøgelserne sigter også mod en udbygning af den molekylære beskrivelse af processer i

krystalo-verflader, herunder også makromolekylers inter-aktion med disse processer. Der studeres vækst og opløsningsmekanismer bl.a. af calciumhydroxyla-patit (HAP) og fluoracalciumhydroxyla-patit i vandige opløsninger, hvori Ca/P forholdet varieres med en faktor ca.

100. Formålet er at bekræfte/afkræfte/udvikle vore modeller for reaktioner, der foregår i krystal-overflader, samt at undersøge processerne i op-løsninger med biologisk relevant sammensætning.

Der udføres også kinetiske undersøgelser af calci-umpyrophosphatdihydrat-krystaller. Udfældning af krystaller af denne art i led giver smerter hos mange ældre mennesker. For nærmere at forstå knogledannelse undersøges induktionstider for HAP udfældning/vækst i vandige suspensioner af collagen, hvortil der covalent er bundet phospho-proteiner, i samarbejde med Dr. M. A. Crenshaw, UNC. For at teste vore teorier for kimdannelse på helt andre systemer undersøges induktionstider for industrielt relevante systemer som udfældning af Al2O3, et bærestof for katalysatorer, i samarbej-de med Ph.D.-stusamarbej-derensamarbej-de Jesper Dohrup (Jørgen Christoffersen, Margaret R. Christoffersen).

Undersøgelser over nitrogen oxid systemet

Nitrogen oxid (NO) er et signalstof, der påvirker blodkarrene, nerverne og hjernen. Det virker på blodkarrene, således at de relaxeres på hjernen og i nervesystemet som transmitter stof. NO medvir-ker ved regulation af hjernens blodgennemstrøm-ning, både ved ændringer i blodets indhold af kul-dioxid og ilt, og ved aktivering af nerveceller. I høje koncentrationer er NO toksisk, og af denne grund er NO i søgelyset for skadelige påvirknin-ger af f.eks. hjernevæv ved neurologiske sygdom-me. Formålet med undersøgelserne er dels ved dy-reeksperimentelle undersøgelser at belyse NO’s betydning som mediator af ændringer i hjernens blodgennemstrømning under basalfysiologiske omstændigheder og når kredsløbet er truet. Enzy-met, nitrogen oxid synthase analyseres og beskri-ves i hjernevæv, aorta og i perifert nervevæv. Den kombinerede basale og kliniske tilgang til proble-met skal skabe et grundlag for terapeutisk inter-vention via ændringer i NO synthase aktiviteten ved hjælp af regulation og anvendelsen af hæm-mere af enzymet. Projektet foregår i samarbejde med Overlæge, dr.med. Martin Lauritzen, KAS Glostrup, Læge, Ph.D.-studerende Nuran Akgø-ren, Med.Fys.Inst. (Inger Rubin og Tracey Warby).

Undersøgelser over transmitter-frisætnings-loka-lisation og kobling til stigning i intracellulær calcium

Forståelse af neurotransmitter-frisætning er blevet udvidet og mere nuanceret. Således synes en ner-vecelle at have en hel række af mulige

transmitter-frisætningsmekanismer til rådighed og den enkel-te nervecelle kan differenciere sit respons på et gi-vet stimulus i langt højere grad end tidligere anta-get. Dette har bl.a. medført at lokalisationen af transmitter-frisætnings-stedet synes at kunne be-finde sig mange andre steder udover den klassiske lokalisation i axon-terminalerne. Vi har efter et par års hardwareudviklingsarbejde været i stand til ved hjælp af bioluminiscens og fluoroscensmikro-skopi at påvise – live – forskel i lokalisationen af transmitter-frisætningsstedet, når nervecellerne bliver stimuleret med K⁺hhv. L-glutamat. Således giver K⁺en nerveendespecifik transmitter-frisæt-ning, mens glutamat leder til frisætning af trans-mitter fra perikarya. Disse fund giver bestemt an-ledning til en udvidet forståelse af kommunikatio-nen mellem nerveceller. Arbejdet er udført i sam-arbejde med Prof. Arne Schousboe, DFH (Bo Bel-hage).

GABA receptor sammensætning og lokalisation

Igennem adskillige år har gruppen beskæftiget sig med lav affinitets GABA receptorer. Der fokuseres nu på subunit sammensætningen af disse recepto-rer og projektet har fået en ny dimension ved til-knytningen af Ph.D. Berit Carlson, UCLA til grup-pen igennem et halvt år. Således haves nu kapaci-tet til ved hjælp af immunohistokemi og avancere-de radioligand bindingsteknikker at blotlægge den præcise komposition af lav affinitets GABA re-ceptorer. Arbejdet udføres i samarbejde med Prof.

Arne Schousboe, DFH og Lektor Gert H. Hansen, IMBG (Bo Belhage).

Panum Instituttets NMR Center

Panum Instituttets NMR Center hører under IMBG, afdeling A. Centerets forskning ligger in-denfor emnet metabolisk regulation, herunder specielt regulation af glycogenolyse, glycolyse og oxidativ fosforylering i lever og muskler. Der er etableret et udstrakt tværdisciplinært samarbejde med det formål at kunne belyse en given proble-matik både i eksperimentelle modeller (cellekul-turer, perfunderede organer, intakte forsøgsdyr) og mennesker, enten under fysiologiske omstæn-digheder eller i klinisk sammenhæng. Centeret har fra 1.2.1994 været en del af Grundforsknings-fondens Muskelcenter. Herudover samarbejder NMR Centeret med onkologisk afdeling K på Rigs-hospitalet og Patologisk-Anatomisk Institut ved-rørende stofskifteregulation i tumorer. I denne sammenhæng er centeret en del af det murstens-løse cancercenter,

Rigshospitalet/Panum/Finseninstituttet. I det forløbene år har der specielt været arbejdet med følgende projekter:

1. Regulation af glycolyse og glycogenolyse i

ske-letmuskulatur, dels hos normale forsøgspersoner, dels i en perfunderet bagbensmuskel fra rotte.

NMR-forsøg på mennesker har overraskende vist, at den traditionelle opfattelse af glycolysere-gulation via metaboliske aktivatorer, specielt uor-ganisk fosfat, AMP og ADP næppe er korrekt, men at glycolysen øjensynlig er intimt sammenkædet med selve kontraktionsprocessen. Undersøgelser-ne videreføres med henblik på at belyse sammen-hængen mellem den intramuskulære calciumkon-centration, det mitochondrielle redoxforhold samt det cytosolære pH. Disse eksperimenter ud-føres i et computerstyret fluorescensmikroskopi system. Desuden gennemføres målinger af glycoly-sehastigheden på skeletmuskulatur hos patienter med malign hyperthermi samt i en eksperimentel model med slagtesvin, som er hetero- eller homo-zygote med hensyn til et specifikt gen, som menes at ligge til grund for malign hyperthermi. Det er i årets løb vist, at mitochondrier fra sådanne dyr har en flere gange forhøjet aktivitet af den såkaldt exo-NADH oxidase knyttet til musklernes mito-chondrier. Det overvejes hvorvidt denne observa-tion kan være resultatet af en indtil nu ukendt ge-netisk ændring hos de dyr, som lider af malign hy-perthermi. Der er desuden gennemført NMR eks-perimenter på mennesker, som tyder på, at den mekaniske nyttevirkning under muskelkontraktio-nen ændrer sig, afhængig af måden hvorpå celler-ne producerer ATP til konktraktionsprocessen.

Hvis disse observationer kan bekræftes, er der tale om en afgørende ændring i opfattelsen af de ter-modynamiske forhold i forbindelse med muskel-kontraktionen.

2. Vi har i årets løb studeret sammenhængen mellem humane musklers maximale aerobe ATP omsætning, dels bedømt ved med NMR teknik, dels ved direkte måling på mitochondrier isoleret fra en biopsi udtaget fra samme muskel, som NMR undersøgelserne er udført på. Resultaterne de-monstrerer, at den mitochondrielle aktivitet fuldt kan redegøre for det maximale aerobe stofskifte.

3. Fosfatstofskiftet i tumorceller er undersøgt.

Der er specielt arbejdet med 2 tumorcellelinier, CPH 54A og CPH 54B samt Ehrlich ascites tumor-celler. Undersøgelserne har været koncentrerede om at påvise energimetaboliske ændringer i disse tumor modeller ved antitumorterapi i form af io-niserende stråling og cytostatica. Undersøgelserne er gennemført både på cellekulturer og solide tu-morer, som er opnået ved at implantere cellelini-erne i huden på nøgne mus. Resultatcellelini-erne sand-synliggør, at en mønsteranalyse af fosfatspektret vil være anvendelig som behandlingsparameter ved tilsvarende terapi på mennesker. I Ehrlich tumor-celler har arbejdet især drejet sig om at belyse hvorledes ændringer i den extracellulære

creatin-Biokemi og Genetik

169

koncentration påvirker cellernes energimetabolis-me og vækst.

4. Regulation af pyruvatdehydrogenase. I årets løb er der desuden startet undersøgelser af regula-tion af enzymet pyruvatdehydrogenase, blandt an-det med henblik på at undersøge, hvorvidt lactat-produktionen i musklen primært er et resultat af anoxi eller kan ses som et misforhold imellem glycolysehastighed og pyruvatdehydrogeneaseak-tivitet. Herudover ønskes belyst, hvorledes pyru-vatdehydrogenase og acetyl-CoA carboxylase akti-viteten medvirker ved den relative ændring i fedt-og kulhydratoxidation i musklen under overgang fra moderat til hårdt muskelarbejde. PDH regula-tionsmekanismen undersøges tillige i hjernen, med henblik på at belyse om den langsomme fjer-nelse af laktat ophobet efter anoxi er forårsaget af PDH hæmning. Den største arbejdsindsats har været etableringen af et pålideligt assay for enzy-met, som nu er lykkedes.

(Bo Belhage, John Dich, Peter Elsner, Peter Fæster Nielsen, Niels Grunnet, Masao Mizuno, Markus Nowak, Bjørn Quistorff, Aivaras Ratkevici-us).

Herudover er der især samarbejdet med Hans og Ulla Rasmussen, Biologisk Kemi, AKI, Jens Bangsbo, Bengt Saltin og Niels H. Secher, Muskel-centeret, Rigshospitalet samt Preben Fogd Jør-gensen, Landbohøjskolen.

Gæster: Masaaki Hattori, Hokkaido Tokai Uni-versity; Yoshi Nakagawa, University of Tokyo, Ja-pan.

Japan; Vasilis Ntziachristos, University of Penn-sylvania, USA.

Kongresser, rejser, gæsteforelæsninger, m.v.:

Jørgen Christoffersen: Gordon Research Confe-rence on Biomineralization, New Hampshire, USA; afholdt seminar på University of North Caro-lina, Dental School at Chapel Hill, USA.

Masao Mizuno: National Congress of Physical Fitness and Medicine, Hiroshima, Japan; 35th An-nual Scientific Meeting, International Medical So-ciety of Paraplegia, Atlanta, Georgia, USA.

Bjørn Quistorff: Chairman ved en session om muskelstofskifte ved møde i International Society for Magnetic Resonance in Medicine, New York, USA; 35th Annual Scientific Meeting, Internatio-nal Medical Society of Paraplegia, Atlanta, Geor-gia, USA.

Aivaras Ratkevicius: The Physiological Society, London, England; 35th Annual Scientific Mee-ting, International Medical Society of Paraplegia, Atlanta, Georgia, USA; 35th Annual Scientific Meeting, International Medical Society of Paraple-gia, Atlanta, GeorParaple-gia, USA.

Disputats- og andre bedømmelseskomiteer:

Jørgen Christoffersen: Ph.D.-bedømmelse ved universitetet i Tunis, Tunesien; Ph.D.-bedømmel-se ved universitetet i Cairo, Ægypten; bedømmelPh.D.-bedømmel-se af speciale i bromatologi ved KVL.

Niels Grunnet: 2 disputatsbedømmelser ved KU.

Foreningsvirksomhed:

Jørgen Christoffersen: Medlem af bestyrelsen for Skandinavisk Selskab for Krystalvækst, Køben-havn, Danmark.

Biokemisk Afdeling B Forskningsvirksomhed:

Afdelingens forskning har i en årrække haft ho-vedvægt på studier af nucleinsyrers egenskaber og syntese samt på forskellige regulationsmekanis-mer for den levende celle.

Erythrocytmembranens transportelementer for langkædede fedtsyrer

Fedtsyrer transporteres af membranelementer med specifikke bindingskapaciteter på membra-nens indre og ydre side. Vi har vist at elementerne for den mættede syre, palmitinsyre, er forskellige fra umættede fedtsyrers elementer. Vi har under-søgt fire umættede fedtsyrer, olie-, linol-, arachi-don- og docosahexaen-syre og påvist, at der er fire elementtyper med delvis overlappende affiniteter.

Overlap og diversitet af elementerne tyder på, at transportelementerne er proteinsegmenter med specificitet determinerende annulære fosforlipi-der (Inge N. Bojesen, Eigil Bojesen).

Cellekernens opbygning

Det antages almindeligvis, at chromatinet i celle-kernen er forankret til et proteinnetværk, der sandsynligvis danner en fysisk forbindelse mellem RNA-syntese og -transport ud af kernen. Nogen sikkerhed om netværkets reelle eksistens i den le-vende celle, endsige dets detaljerede opbygning, har dog ikke kunnet opnås med eksisterende me-toder. Vi har ved hjælp af en ny teknik bekræftet eksistensen af et nukleært netværk og vist, at ker-nens enkelte strukturelementer (nucleolus, inter-chromatin granula, periinter-chromatin fibre og granu-la samt kernelegemer) er forbundet med et net-værk af fibre, der er forankrede til lamina og til kerneporerne. Vores arbejde er koncentreret om at opklare hvorledes dette netværk er opbygget (Mogens Engelhardt).

Regulering af genekspression

De ribosomale 5S rRNA gener er velegnede til at undersøge genekspression, idet der foruden et

be-tydeligt antal ægte gener, også findes genvarianter og pseudogener. Gener er isoleret fra humane og animalske celler og de DNA sekvenser, der har be-tydning for genregulering i de respektive celler, karakteriseres. En enkelt promotor sekvens, der findes at være konserveret i gener fra forskellige arter, er af stor betydning for regulering af gen-ekspression, selvom også artsspecifikke forskelle ses. Ved in situ hybridisering til metafasekromoso-mer fra humane celler og fra andre animalske cel-ler bestemmes genernes lokalisation. Projektet udføres i samarbejde med Bodil Lomholt, IMBG, Afdeling for Medicinsk Genetik (Sune Frederik-sen, Charlotte Hallenberg, Lars Riff Jensen).

Studier over celledød

Vor påvisning af en ny form for medium-relateret celledød, observeret hosTetrahymena,er publice-ret (J. Cell Physiol. 169,139,1996). Ved at ændre dyrkningsbetingelserne kan vi nu studere andre former for »accidental cell death(ACD)«. ACD kan forårsages af energimangel (sultedød), af salt-ubalance (spec. Mg²⁺og Ca²⁺) eller af spormetal-ioner (f.eks. Zn²⁺og Co²⁺). Sultedøden og saltdø-den er stærkt afhængig af temperaturen, idet lav temperatur forøger overlevelsestiden. En tilsva-rende effekt fås med stoffet Pluronic F-68 (10^-5 M). En molekylær karakterisering af celledødsfor-merne planlægges (Per Hellung-Larsen, Joachim J. Hagemeister, Fahed Assaad, Thomas Birk Kristi-ansen, Michael Grave).

Cellulært indhold af nucleotidtriphosphater og regulering af cellevolumen

Under vore fortsatte undersøgelser af nucleosid-triphosphaters effekt på cellevolumen, har vi fun-det, at ikke kun øgning af cellulært indhold af GTP og ATP, men også omdannelse af adenosina-nalogen purinribosid til det tilsvarende triphos-phat kan inducere cellulært tab af KCl og volu-menreduktion. For hvert af de nævnte triphospha-ter gælder det, at en øgning af det cellulære ind-hold med 8-10 mM giver maximal (ca. 20%) volu-menreduktion. For purinribosidtriphosphat kan koncentrationen imidlertid øges yderligere til ca.

30 mM. Dette sker, idet ækvivalente mængder af orthophosphat og Na⁺plus K⁺optages i cellerne.

Dette forårsager, at cellerne af osmotiske grunde samtidig optager vand, således at cellevolumenet vender tilbage til udgangsværdien. Under vore forgæves søgen efter stoffer, som virker hæmmen-de på ovennævnte fænomener har vi funhæmmen-det, at proteinkinasehæmmeren staurosporin i sig selv inducerer tab af KCl og volumen. Vi har indirekte bevis for, at det er proteinkinase C, der hæmmes.

Disse uventede resultater er dog forenelige med meddelelser i litteraturen om, at proteinkinase C

kan modvirke åbning af bestemte Cl÷ kanaler (Hans Klenow, Kay Overgaard-Hansen, Mads Mar-cussen).

Signaltransduktion for overlevelse, proliferation og korttidshukommelse i den encellede eukaryot Tetrahymena

Overlevelse og proliferation kan reguleres via au-tokrine peptidsignalmolekyler. Preliminære un-dersøgelser har vist, at signaltransduktion involve-rer både serin/threonin- og tyrosinkinaseaktivitet.

Korttidshukommelse (adaption under kemotaxi) reguleres tilsyneladende via et overlappende sæt af intracellulære enzymsystemer. Både overlevelse og korttidshukommelse kan reguleres af bl.a. hu-mant insulin og formodes at involvere fosforyle-ringen af cilieproteiner på ca. 50-55 kDa. Vi har påbegyndt identifikation og karakterisering af de enkelte komponenter involveret i signaltransduk-tionen (Vagn Leick, Søren Tvorup Christensen).

Cellulære effekter af variation af den intracellu-lære koncentration af henholdsvis ATP og P

ⁱ

»Cell surface blebbing« (udposninger på celle-membranen) er et tidligt, reversibelt tegn på ilt-mangel, som er beskrevet i mange forskellige cel-letyper. Længere tids iltmangel kan føre til ruptur af disse udposninger og dermed irreversibel celle-skade/celledød. I vores arbejde er det blevet vist, at Pⁱkunne tænkes at være den udløsende faktor for cell surface blebbing: 1) Blebbing kan induce-res i ascites tumor celler ved at hæve den cellulære Pⁱkoncentration uden samtidig iltmangel, 2) den intracellulære Pi koncentration stiger under ilt-mangel, 3) »the pH paradox«, som beskriver det forhold, at lavt pH har en stabiliserende effekt på cellemembranen under iltmangel kan forklares ud fra en relativt lav Pⁱkoncentration ved lavt pH.

Projektets anden del omhandler den cellulære ATP koncentrations rolle under cellecyclus: Det er vist på synkroniserede fibroblaster, at ATP koncen-trationen stiger under mitosen. I vækststandsede, interfase celler er det muligt at inducere depoly-merisering af det mikrotubulære netværk ved kun-stigt at hæve den intracellulære ATP koncentra-tion. Disse forandringer svarer nøje til de ændrin-ger, der sker, når celler begynder at dele sig (pro-metafase, mitose). Det konkluderes, at variationer i den cellulære ATP koncentration spiller en vigtig rolle i forbindelse med celledeling. Arbejdet ud-føres i samarbejde med Philip Just Larsen, Med.

Anat. Inst., afdeling B (Mads Marcussen).

Struktur og funktion af RNA molekyler

Laboratoriet beskæftiger sig hovedsageligt med opklaring af strukturen af specifikke RNA moleky-ler og karakterisering af tilknyttede proteiner.

Biokemi og Genetik

171

Især undersøges en række af os opdagede nukleo-lære RNA molekyler. Undersøgelserne omfatter bl.a. genkloning og ekspressionsanalyser, kemisk og enzymatisk strukturprobning samt forskellige former for partikelkarakterisering. I forlængelse af de strukturelle studier undersøges om RNA mo-lekylerne har funktion i forbindelse med forar-bejdning af forstadier til ribosom RNA. I et be-slægtet projekt undersøges struktur-funktionsrela-tioner for en ny klasse af ribozymer (RNA enzy-mer). Disse ribozymer forventes at kunne udvikles til bioteknologisk anvendelige molekyler (Henrik Nielsen).

Biomolekylær genkendelse

Gruppens forskning defineres som biomolekylær genkendelse, med særlig reference til det geneti-ske materiale DNA, og med henblik på at udvikle syntetiske reagenser, som er i stand til at genkende DNA’et på en sekvensspecifik måde. Sådanne rea-genser kan anvendes til at modulere genekspres-sionen og har derved et meget stort anvendelses-potentiale i molekylærbiologiske undersøgelser af enkelte geners biologiske funktion og ikke mindst i udviklingen af gen-terapeutika. Denne forskning har bl.a. ført til udviklingen af et DNA-lignende molekyle, PNA (akronym for »Peptide Nucleic Acid«), som kemisk set er en hybrid mellem et peptid og et DNA-molekyle, men som uagtet dets kemisk set ringe lighed med DNA har bibeholdt DNA’ets strukturelle egenskaber. PNA anses for at være et af de bedste bud på en »lead«-forbindelse til udvikling af næste generation af »antisense« og

»antigene« gen-terapeutika. Forskningen er dels koncentreret om at videreudvikle PNA-teknologi-en i kemisk hPNA-teknologi-ensePNA-teknologi-ende, dels om at studere de mo-lekylære mekanismer bag PNAs genkendelse af DNA og RNA. Endelig prøver vi at udvikle et PNA gen-terapeutikum rettet mod et cancer-relateret gen, for hvilket forøget aktivitet er karakteristisk for malign brystkræft (Peter Nielsen, Leif Chri-stensen, Helle Knudsen, H. Jakob Larsen, Niels Erik Møllegaard, Jens Nederby Nielsen, Thomas Bentin).

Kongresser, rejser, gæsteforelæsninger, m.v.:

Inge og Eigil Bojesen: Gæsteforelæsere på Sem-melweis University, Budapest, Ungarn.

Peter E. Nielsen: »Modified Nucl. Acids. Che-mistry & applications«, Cold Spring Harbor, USA;

»3rd Ann. Med. Chem. Symposium«, Buffalo, USA; »PNA-RMC meeting«, Boston University, USA; »International Congress. Therapeutic Oli-gonucleotides«, Rom, Italien; »International Bi-ophys. Congress«, Amsterdam, Holland; »Cancer Drug Discovery Conference«, Killarney, Irland;

»Kemia 96«, Helsinki, Finland; »International

Symposium on Life Chemistry«, Beijing, Kina;

»The Augustusburg Conference«, Augustusburg, Tyskland; »Symposium on Biotechnology«, Stock-holm, Sverige; »International Conference«, Asco-na, Schweiz.

Disputats- og andre bedømmelseskomiteer:

Sune Frederiksen: Formand i adjunktbedømmel-sesudvalg ved KU; formand i Ph.D.-bedømmelses-udvalg ved KU.

Biokemisk afdeling C Forskningsvirksomhed:

Afdelingens forskningsaktiviteter omfatter op-rensning og karakterisering af proteiner og hor-moner, studier af normale og patologiske proces-ser knyttet til biologiske membraner samt under-søgelser af de molekylære forandringer, der op-står ved stimulering og hæmning af cellevækst.

Sigtet med en del af afdelingens forskning er at belyse basale cellebiologiske fænomener, som ved-rører biosyntese og intracellulær transport af membranproteiner, signaltransduktion og aktive-ring og reguleaktive-ring af blodcirkulation og fibrinoly-se. En sådan forøget viden er af betydning for for-ståelsen af normale og patologiske cellers fenoty-pe og af proteiners og hormoners funktion.

Insulin signaltransduktion

Insulin stimulering af metaboliske processer.

Ved anvendelse af hepatocytter fremstillet med EDTA perfusionsmetode i stedet for den traditio-nelle collagenase metode studerer vi insulins ef-fekt på metaboliske processer. Glycogensyntesen kan øges 2 gange ved insulinstimulation. For at studere signalveje for den insulinstimulerede glycogensyntese blev effekten af forskellige inhibi-torer undersøgt. Forsøgene tyder på at phosphati-dylinositol 3-kinase er et af signalmolekylerne, li-gesom en aktiv MAP kinase er nødvendig. Prelimi-nære undersøgelser har vist, at vi i isolerede he-patocytter fra fastede og refodrede rotter også op-når en øget lipogenese ved insulin stimulering.

Klarlægning af signalvejen for lipogenesen i he-patocytter er ved at blive undersøgt. Studierne fo-regår i samarbejde med lektor J. Vinten Med. Fys.

Inst. (Jens Carlsen, Kirsten Christiansen).

Phosphatidylinositol 3-kinase som

In document ÅRBOG 1996 (Sider 167-172)